称取粮谷试样约 50.0 g或蔬菜试样 200.0g(精确至0.1g)置于1000mL圆底烧瓶中，根据试样的含水量加入适量的水和 9 mol/L 的硫酸溶液，使瓶内溶液的总体积约为200～300mL(包括试样的含水量)、硫酸的浓度为2.5mol/L。加入数粒小玻璃珠，连接回流冷凝管。加热至沸(如产生大量气泡可加入几滴正辛醇)并使之回流 5 h以上。取下烧瓶，冷却，加入500 mL水。将提取液倒入已铺垫好双层快速滤纸(含油试样可多垫几层滤纸)的平底漏斗上，用抽滤装置过滤，用少量水分数次洗涤。对非油类试样，将滤液倒入 1 000 mL的烧杯中。
    对含油试样可将滤液倒入 1 000 mL分液漏斗中，然后用 100 mL 苯分三次萃取，收集水相于1000 mL烧杯中。于烧杯中的溶液中加入 12.5 mol/L 的氢氧化钠溶液，其体积相当于回流前所加 9 mol/L硫酸溶液的量，加入 5g EDTA，搅拌至完全溶解，加水至溶液总体积约900 mL ，然后再用 10 mol/L 的氢氧化钠溶液调节 pH至 9 。冷却至室温，将溶液全部倒入 1 000 mL的分液漏斗中备用。
3.4.2 净化和洗脱
3.4.2.1 净化
将盛有提取液的分液漏斗固定在净化柱的上方(可用洁净的胶管将二者连接)，调节活塞，使溶液以 10～12 mL/min的速度过柱。过柱后移开分液漏斗。然后以 5 mL/min的速度依次用 50 mL水、50 mL 2mol/L的盐酸溶液、 50 mL水和 50mL稀氯化铵溶液淋洗柱子，弃去所有流出液。 字串9
3.4.2.2 洗脱
将上述处理后的柱子用饱和氯化铵溶液洗脱柱上百草枯，洗脱速度为 0.5～1mL/min，收集50 mL洗脱液于 50 mL容量瓶中。
注：洗脱时柱温(环境温度)不应低于 20℃。
3.4.3 测定
3.4.3.1 测定波长的选择
吸取 10 mL含百草枯二氯化物为 1.0μg/mL的百草枯标准工作液于 50 mL比色管中，加入 2 mL连二亚硫酸钠溶液，摇匀后立即倒入 5 cm比色皿中，置于紫外分光光度计比色皿中进行测定，设定波长从 410至 380 nm 进行吸光度扫描，选择最大吸收峰处为测定波长λm，然后分别选择 λm±4 nm处为校正波长λh和λ1。
3.4.3.2 工作曲线的绘制
分别吸取百草枯标准贮备溶液 0.00 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL、0.75 mL、1.00 mL 和 1.50 mL于 8只100 mL容量瓶中，各加入饱和氯化铵溶液至刻度。此工作液百草枯的浓度分别为 0.00 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.25 μg/mL、0.50μg/mL、0.75 μg/mL、1.00μg/mL和1.50μg/mL。分别吸取上述工作液10mL于8支50mL比色管中，各加入 2 mL连二亚硫酸钠溶液，混匀后立即用紫外分光光度计，在λm处以空白液对照测定各工作液的吸光度，以吸光度为纵坐标，相应浓度为横坐标绘制标准曲线。 字串5
同时于λh和λ1处(与空白液对照)分别测定 1.00μg/mL百草枯工作液的吸光度。
3.4.3.3 样品测定
吸取 10 mL洗脱液于 50 mL比色管中，加入 2 mL连二亚硫酸钠溶液，混匀后立即于λm、λh 和λ1处以空白液对照分别测定吸光度。 
3.4.4 空白试验
除不称取样品外，按上述测定步骤进行。
3.5 结果计算和表述
按下式计算试样中百草枯(以百草枯二氯化物计)的残留量：
  

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